|
干货分享 | Western blot怎么那么多内参？你选对了吗内参，顾名思义，就是内部参照。它在 Western Blot 实验中起到了重要的作用，用于校正蛋白质样本的加载量差异和检测系统的误差。就像是一把尺子，可以让我们在比较不同样本之间的蛋白质表达时有一个基准。 那么，如何选择内参呢？一般来说，我们需要考虑以下几个因素： 1、蛋白表达丰度：内参应该在样本中稳定表达，且表达量相对较高，这样才能有效地检测到内参信号。 2、分子量：内参的分子量应该与目标蛋白的分子量有明显差异，以便在电泳分离时能够分开。 3、细胞类型和组织特异性：根据你的实验样本类型，选择适合的内参。例如，β-actin 常用于哺乳动物细胞，而 Tubulin 则更适合检测细胞骨架蛋白。 推荐使用一些常见的内参，如 β-actin、GAPDH 和 HSP90。这些内参在大多数细胞类型中都有稳定表达，且分子量适中，容易检测。 在选择内参时，还需要注意一些实验细节。比如，确保内参和目标蛋白的抗体不相互干扰，并且在实验中正确地设置对照组，以验证内参的表达是否稳定。 |
