近年来，非编码RNA（Non-coding RNA）的研究成为热点，特别是microRNA的研究。当发现一个新的miRNA，并研究其是否对相关疾病具有调控作用时，就需先对它和靶基因的调控关系做一验证，而目前最常用的靶向关系的验证方法就是：双荧光素酶报告基因检测。本文就相关检测原理、萤火虫荧光素酶、海肾萤光素酶、报告基因、检测步骤、细胞裂解及Luciferase检测作简单介绍。

由于miRNA主要是通过作用于靶基因的3'UTR区域，这样就可以将目的基因3'UTR区域构建至含有报告基因萤光素酶的载体上，通过比较miRNA mimics或miRNA inhibitor作用后报告基因表达的改变（监测萤光素酶的活性变化）可以定量反映出miRNA对目的基因的抑制作用。结合定点突变等方法还可以进一步确定miRNA与靶基因3'UTR的作用位点。

萤火虫荧光素是从甲虫（Photinus pyralis）中分离得到，分子量为61kDa的蛋白，在ATP、镁离子和氧气存在的条件下，可以催化荧光素(luciferin)氧化成氧化荧光素(oxyluciferin)，在luciferin氧化的过程中，会发出生物萤光(bioluminescence)。萤火虫萤光素酶催化luciferin发光的最强发光波长为560nm。

海肾（Renilla）荧光素酶则是从海肾（Renilla reniformis）中分离，分子量为36kDa的蛋白，在氧气存在的条件下，可以催化腔肠素(coelenterazine)发生氧化，在coelenterazine氧化的过程中也会发出生物萤光(bioluminescence)。海肾萤光素酶催化coelenterazine发光的最强发光波长为465nm。

生物萤光可以通过荧光酶标仪进行测定，从而对实验结果进行定量。

报告基因（report gene）是指一组编码易被检测的蛋白质或酶的基因，可通过报告基因产物的表达来“报告”目的基因的表达调控。