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动物模型 | 大鼠颅骨缺损动物模型构建与影像学分析


由严重创伤、骨感染、肿瘤等原因造成的大段骨缺损是骨科临床治疗的一大难题,建立骨缺损动物模型势在必行。

动物的选择

动物选择的频率分别为:大鼠38%;兔子19%;小鼠13%;羊11%;狗9%,山羊4%;其它4%

实验方法

一、动物模型的构建


1、选取8周龄(即 56 天龄)以上的SD大鼠,MDL选取12周龄雄性SD鼠,体重250~300g,3%戊巴比妥(0.3mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠;
2、在大鼠颅骨手术局部进行备皮,用手术刀从鼻梁处开始切至颅底,将皮肤、皮下组织、肌肉、骨膜拉开以完全暴露颅顶骨,使用8mm直径的打孔器(必须是正圆形骨钻,圆形伤口)在顶骨中央形成8mm圆形全层颅骨缺损,用生理盐水冲洗降温,同时保持硬脑膜的完整性(颅骨全层缺损)

二、植入成骨材料


植入成骨材料(记录填充材料的重量,成骨材料需填平缺损部位)。使用4-0不可吸收缝线缝合骨膜,使用3-0不可吸收缝线缝合皮肤;术后连续3d肌肉注射青霉素40万U,预防感染。术后当天和术后4、8、12周行CT检查,并通过CT断层切面测量骨缺损面积;术后12周处死大鼠,沿原切口暴露缺损处观察骨缺损修复情况。


注意


1、为排除年龄和雌激素对于骨修复能力的影响,MDL采用12周龄的成年雄性SD大鼠进行建模。

2、经MDL实验室验证,直径8mm较适合作为大鼠颅骨骨缺损模型的标准尺寸。当大鼠颅骨骨缺损的直径为8mm时,骨膜鞘已经不能桥接,不能为骨组织提供所需的支撑和营养,导致骨缺损不能修复。

大体、影像学观察

术后观察动物的进食、活动等一般情况,切口有无红肿、渗出等表现。术后当天和术后4、8、12周行CT检查,并通过CT断层切面测量骨缺损面积;术后12周处死大鼠,沿原切口暴露缺损处观察骨缺损修复情况。

结果

1、一般情况

实验大鼠均未死亡,正常进入统计。大鼠麻醉清醒后步态正常,可正常觅食、饮水。2只大鼠术后出现明显肿胀,经换药和肌肉注射抗生素,肿胀逐渐吸收消除,其余大鼠未出现此类症状。


2、影像学检查

术后当天CT显示,手术区域无碎屑残留,骨缺损周围断端平行整齐。随着术后观察时间的延长,术后12周时仅可见缺损断端呈楔形骨生长,但极少呈现断端桥接,测量其直径与术后当天相比无明显差异。与术后当天相比,实验组无统计学差异。

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