免疫细胞是人体免疫应答的重要参与者,同时还是免疫功能的执行者。广义的免疫细胞一般指参与免疫应答和免疫效应的所有细胞。免疫细胞包括T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞、单核巨噬细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞红细胞和血小板。其中,T淋巴细胞和B淋巴细胞,是免疫应答中最活跃和最重要的免疫细胞,所以,这两种细胞又称为免疫活性细胞。
流式细胞术检测免疫细胞的原理与一般常规免疫检测相似,也是通过抗体与细胞中蛋白的特异性结合来检出的,可以分为间标检测和直标检测,其中主要是根据所使用的抗体来区分的。
通常在流式检测时优先选用直标抗体。T淋巴细胞特异性标记蛋白为CD3,其中又可以分为CD4+和CD8+两个亚群;B淋巴细胞特异性标记蛋白为CD19;NK细胞特异性标记蛋白为CD56或CD16,但是一定不表达CD3。所以利用各种细胞特异性表达的蛋白与对应单克隆抗体特异性结合,再搭配合理的荧光染料,就可以把目标细胞检测出来。
T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞流式检测结果示意图:
流式鉴定标记 | 细胞名称 | 临床应用 |
CD3+ | 总T细胞 | 淋巴细胞是细胞、体液免疫的重要组成,测定其各种亚型的含量可以有效辅助诊断自身免疫、免疫缺陷、恶性肿瘤、艾滋病等疾病。对于疾病的发病机制,观察疗效及监测预后等有重要意义。例如: (1)CD4淋巴细胞减少:常见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷症、艾滋病以及应用免疫抑制剂的患者。 (2)CD8淋巴细胞减少:常见于自身免疫病,如SLE、艾滋病初期、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染。 (3)CD4/CD8比值异常:SLE、艾滋病、传染性单核细胞增多症、急性巨细胞病毒感染、脊髓移植恢复期等患者比值显著降低;类风湿性关节炎、I型糖尿病等患者比值会显著升高;在器官移植后较移植前比值升高,则发生排异反应的可能性会升高。 |
CD3+CD4+ | 辅助性/诱导性T细胞 |
CD3+CD4+HLA-DR+ | 活化的辅助性/诱导性T细胞 |
CD3+CD4+CD25+ | 活化的辅助性/诱导性T细胞 |
CD3+CD8+ | 抑制性/杀伤性T细胞 |
CD3+CD8+CD25+ |
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CD3+CD8+HLA-DR+CD38+ | 活化的抑制性/杀伤性T细胞 |
CD19+ | 总B细胞 |
CD19+CD23+ | 活化的B细胞 |
CD3-CD(56+16)+ | NK细胞 |