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首页 >> 科研产品 >>分子生物学 >>基因组提取 >> 酵母基因组DNA提取试剂盒 (溶液型)
详细说明

酵母基因组DNA提取试剂盒 (溶液型)

价格
470.00 元/100次
城市
全国
供货数量
10000
最小定量
1
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产品编号 MD93
  • 产品说明
  • 产品参数
使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。1、取酵母细胞(不超过5x107 ce l1 s),12000rpm离心1min,尽量吸除上清。2、酵母细胞壁的破除:向酵母菌体中加入470ul山梨醇Buffer。充分悬浮菌体,加入25ul酵母破壁酶和5ul β-巯基乙醇,充分混匀。30℃处理1-2h,期间可颠倒离心管混匀数次。3、12000rpm离心lmin,弃上清,收集沉淀。4、向沉淀中加入200ul溶液A,充分悬浮沉淀,向悬浮液中加入20ul的RNase A(10mg/ml),充分颠倒混匀,室温放置10min。5、加入20ul的蛋白酶K(10mg/ml),充分颠倒混匀。65℃水浴消化15-30min,消化期间可颠倒离心管混匀数次,直至样品消化完全为止。6、加入200ul溶液B,再加入200ul无水乙醇,充分颠倒混匀,此时可能会出现絮状沉淀,不影响DNA的提取,可将溶液和絮状沉淀都加入吸附柱中,室温放置2min。7、12000rpm离心2min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。8、向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前请先检查是否己加入无水乙醇)。12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。9、向吸附柱中加入600ul漂洗液, 12000rpm离心l min, 弃废液,将吸附柱放入收集管中。10、12000rpm离心2min,将吸附柱敞口置于室温或50℃温箱放置数分钟,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,否则漂洗液中的乙醇会影响后续实验如酶切、PCR等。11、将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中央悬空滴加50-200ul经65℃水浴预热的洗脱液,室温放置5min,12000rpm离心l min。12、离心所得洗脱液再加入吸附柱中,12000rpm离心2 min,即可得到高质量的基因组DNA。
本试剂盒适用于从酵母样品中提取高纯度的总DNA,本品无需使用苯酚、氯仿等有机溶剂抽提,可获得最大为50Kb的DNA,同时对100bp的DNA片段也能有效的回收。本试剂盒采用优化的缓冲液体系使裂解液中的DNA高效结合在硅胶膜上,而其他污染物可流过膜,使用低盐缓冲液或水洗脱,即可获得高纯度的DNA。提取的DNA可直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记等下游实验。
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